Kỹ thuật định lượng các γH2AX foci được sử dụng để nghiên cứu tổn thương chuỗi đôi DNA (DSB) ở tế bào do tác động của bức xạ ion hóa. Tế bào lympho máu ngoại vi và nguyên bào sợi người được chiếu xạ tia X liều 2 Gy. Số lượng các γH2AX foci trong tế bào được phân tích bằng phương pháp định lượng miễn dịch huỳnh quang dùng các kháng thể đặc hiệu. Đánh giá ở các thời điểm sau khi tế bào được chiếu xạ trong khoảng 0-5 giờ để xác định động học các γH2AX foci ở tế bào. Kết quả chỉ ra tế bào lympho đạt lượng γH2AX foci cao nhất ở thời điểm 1 giờ, còn nguyên bào sợi là ở thời điểm 45 phút sau chiếu xạ. Điều này cho thấy bức xạ gây tổn thương DNA và khả năng sửa chữa của 2 loại tế bào này là khác nhau. Các nghiên cứu tổn thương DSB in vitro ở các loại tế bào này bằng kỹ thuật định lượng γH2AX foci cần được thực hiện ở các thời điểm như trên để đảm bảo tính ổn định của các γH2AX foci được sinh ra tại vị trí các DSB.
The technique for quantification of γH2AX foci was used for studying the DNA double-strand break (DSB) of the cells exposed to ionising radiation. Peripheral blood lymphocyte and human fibroblast cells were exposed to X-ray irradiation at a dose of 2 Gy. The number of H2AX foci in cells was scored by immunofluorescence quantification using specific antibodies. An evaluation was conducted at time points after irradiation between 0 and 5 hours to determine the kinetics of H2AX foci in cells. The results showed that lymphocytes reached the highest number of γH2AX foci at 1 hour and fibroblasts at 45 minutes after irradiation. This indicated that radiation damages DNA and the repair ability of these two cell types were different. The in vitro studies of DSB of these cell types using the γH2AX assay should be performed at the above time points to ensure the stability of the γH2AX foci generated at the DSB sites.
- Đăng nhập để gửi ý kiến