Một số chủng probiotic chứa gen kháng kháng sinh trên nhiễm sắc thể, có thể tiềm ẩn nguy cơ truyền gen này sang vi sinh vật khác, đặc biệt là vi sinh vật gây bệnh bằng phương thức chuyển gen theo chiều ngang. Mục tiêu: Kiểm tra khả năng truyền gen đề kháng kháng sinh từ probiotic sang Bacillus subtilis PY79 in vitro. Đối tượng và phương pháp: MIC của vi khuẩn probiotic và B. subtilis Y79 được xác định bằng phương pháp pha loãng kháng sinh trong thạch. ADN nhiễm sắc thể của probiotic được chiết và biến nạp vào B. subtilis PY79 bằng hóa biến nạp. Thể biến nạp được khảo sát hình thái khuẩn lạc, nhuộm Gram, xác định MIC và kiểu gen bằng rep-PCR. Kết quả: Khi chuyển gen của vi khuẩn probiotic vào B. subtilis Y79 thu được 12 thể biến nạp có MIC với chloramphenicol cao gấp 4-32 lần so với MIC của B. subtilis PY79; 10 thể biến nạp có MIC với tetracyclin cao hơn MIC của B. subtilis PY79. Trong số 22 thể biến nạp, 4 chủng có kiểu gen tương đồng khoảng 80% với B. subtilis PY79, không có chủng nào có kiểu gen tương đồng 100% với B. subtilis PY79, chứng tỏ kiểu gen của các thể biến nạp đã thay đổi. Kết luận: Quá trình chuyển gen đề kháng kháng sinh theo chiều ngang có thể xảy ra từ probiotic sang B. subtilis PY79 qua biến nạp in vitro.
Some probiotic strains possess intrinsic antibiotic-resistance genes have potential risk of spreading these genes to other bacterial species, especially in case of pathogenic bacteria by horizontal gene transfer. Objectives: Investigate the possibility of transformation antibiotic-resistance genes f-rom probiotics to Bacillus subtilis PY79 in vitro. Methods: Minimal inhibitory concentration (MIC) of probiotics and B. subtilis PY79 were determined. using agar dilution method. Genomic DNA of probiotic strains was extracted and transformed to B. subtilis PY79 via chemical transformation. Transformants were c-haracterized colony morphology, Gram stain, determined MIC and genotype by rep-PCR. Results: Transfer of probiotic’s D A to B. subtilis PY79 yield 12 transformants that showed MIC value for chloramphenicol 4 to 32 times higher than the value of B. subtilis PY79, 10 transformants had MIC value for tetracyclin higher than B. subtilis PY79. Among 22 transformants, there were 4 strains had approximately 80% genotype similarity to B. subtilis PY79, none of these strains showed 100% genotype similarity to B. subtilis PY79, indicated that genotype of transformants have changed. Conclusions: Horizontal transfer of antibiotic-resistance genes is possible f-rom probiotic strains to B. subtilis PY79 through in vitro transformation.
- Đăng nhập để gửi ý kiến