Bệnh tay chân miệng (TCM), thường gặp ở trẻ dưới 5 tuổi, gây ra bởi các chủng vi rút thuộc họ enterovirus, trong đó hai tác nhân chính là Coxsackievirus A16 (CVA16) và Enterovirus 71 (EV71). EV71 và CVA16 có thể gây nên các biến chứng như viêm não, viêm cơ tiêm, dẫn đến tử vong. Cho đến nay, vẫn chưa có vắc xin và thuốc đặc hiệu trị EV71 và CVA16. Vì thế việc phát hiện chẩn đoán nhanh hai loại vi rút này là rất cấp thiết. Phương pháp phát hiện bệnh hiện nay chủ yếu dựa vào triệu chứng lâm sàng, kĩ thuật sinh học phân tử RT-PCR đang là tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán TCM. Tuy nhiên, RT-PCR đòi hỏi thiết bị phức tạp, đắt tiền và chỉ có thể thực hiện trong điều kiện phòng thí nghiệm. Trong khi đó, RT-LAMP thừa hưởng tất cả ưu điểm của RT-PCR về độ nhạy, tính đặc hiệu; hơn nữa, kĩ thuật lại đơn giản và dễ thực hiện. Trong nghiên cứu này, qui trình RTLAMP được tối ưu có khả năng phát hiện EV71 và CA16 với giới hạn 1 fg đối với EV71 và 10 fg đối với CA16; phản ứng được thực hiện tại nhiệt độ cố định (60°C) trong 35 phút; kết quả có thể được xác định bằng mắt thường thông qua màu sắc của phản ứng thể hiện tiềm năng ứng dụng cao của phương pháp đối với chẩn đoán bệnh tại chỗ.
Hand, foot and mouth disease (HFMD) is caused by many types of human enterovirus, in which human enterovirus 71 (EV71) and coxsackievirus A16 (CVA16) are the two main etiological agents. HFMD is common in children under 5 years old and EV71 and CVA16 can cause complications such as encephalitis, myositis leading to death. An effective drug or vaccine against EV71 and CVA16 infection is currently not available. For early treatment it is desirable to accurately and quickly determine the pathogen type of HFMD. Current detection methods are mainly based on clinical symptoms, and RT-PCR is the gold standard for diagnosing. However, RTPCR requires complicated, expensive equipment and specialized lab environments. Meanwhile, an isothermal nucleic acid amplification method called RT-LAMP has all the benefits of RT-PCR in terms of sensitivity, specificity but with easier technology and low cost. In this study, the optimized RT-LAMP method has been able to detect EV71 and CA16 specific sequences with detection limit of 1 fg for EV71 and 10 fg for CA16. The reaction is performed at a single temperature of 60 0C for 35 minutes; the visible results can be determined by means of the reaction's colour, indicating that the method is highly suitable for point-of-care detection.
- Đăng nhập để gửi ý kiến