Nghiên cứu này nhằm tìm ra một RNA vòng tiềm năng—đóng vai trò là yếu tố thứ cấp—tham gia vào cơ chế bệnh sinh Leber. Phương pháp: các dòng TBHTKVM được biệt hóa từ tế bào gốc vạn năng nhân tạo (TBGVNNT) có nguồn gốc từ người mang gen ND4 bình thường, người mang đột biến ND4 của bệnh Leber và bệnh nhân Leber. Chúng tôi so sánh sự biểu hiện của RNA vòng giữa các dòng TBHTKVM từ nguồn trên để chọn ra RNA vòng tiềm năng. Sau đó, Chúng tôi tiếp tục tăng hoặc giảm biểu hiện RNA vòng tiềm năng này trên các dòng TBHTKVM để tìm hiểu về vai trò của RNA vòng trong cơ chế bệnh Leber. Kết quả: TBGVNNT được tạo ra từ các tế bào máu ngoại vi có nguồn gốc từ người mang gen ND4 bình thường, người mang đột biến ND4 của bệnh Leber và bệnh nhân Leber được biệt hóa thành công thành TBHTKVM. Các TBHTKVM nguồn gốc từ bệnh nhân Leber có tỉ lệ chết theo chương trình cao hơn đáng kể so với các dòng TBHTKVM còn lại. Kết quả RT-PCR xác nhận RNA vòng 0087207 là RNA vòng có mức biểu hiện khác biệt nhất trong các TBHTKVM nguồn gốc từ bệnh nhân Leber so với hai dòng TBHTKVM còn lại. Sự biểu hiện quá mức của RNA vòng 0087207 đã làm tăng tỉ lệ chết theo chương trình trong các TBHTKVM mang đột biến ND4 của bệnh Leber nhưng không thay đổi mức chết theo chương trình trong các TBHTKVM mang gen ND4 bình thường. Thêm vào đó, việc loại bỏ RNA vòng 0087207 làm giảm tỉ lệ chết theo chương trình trong các TBHTKVM có nguồn gốc từ bệnh nhân Leber. Kết luận: Nghiên cứu của chúng tôi chỉ ra rằng sự biểu hiện RNA vòng 0087207 có thể thay đổi tỉ lệ chết theo chương trình của TBHTKVM trong bệnh Leber. Việc điều chỉnh RNA vòng 0087207 trong TBHTKVM có thể đem đến hướng tiếp cận điều trị mới cho bệnh nhân Leber.
Leber hereditary optic neuropathy (LHON) is mainly the degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) associated with high apoptosis level caused by mutations in the subunits of complex I of the mitochondrial electron transport chain. The treatment is still infant while efforts of correcting genes or using antioxidants do not bring good and consistent results. LHON mutation carrier phenotype suggests that disease’s pathogenesis is complex, in which secondary factors exist and cooperate with the primary complex I dysfunction. The feature of incomplete penetrance indicates the importance of nuclear inheritance for the LHON phenotype. We compared the NGS data of iPSCderived RGCs, including a family of normal, ND4 mutation carriers, and ND4 mutationpatients. We found that circRNA_0087207 had the most significantly higher expression level in the patient optic ganglion cells. In addition, overexpression of circRNA_0087207 in RGCs derived from ND4 mutation carriers can increase the level of apoptosis. In particular, overexpression of circRNA_0087207 in normal RGCs does not increase the apoptosis level. Inhibiting the expression of circRNA_0087207 in the patient cells can effectively reduce cell apoptosis. ND4 mutation is a necessary primary factor for optic neuropathy. Our results show that the circRNA_0087207 upregulation cooperated with ND4 mutation to regulate apoptosis in LHON-hiPSC derived RGCs.
- Đăng nhập để gửi ý kiến