Triển khai kỹ thuật Delta-PCR trong khảo sát đột biến FLT3-ITD. Đối tượng: Mẫu người bệnh có 2 đột biến FLT3-ITD đã chẩn đoán bằng kỹ thuật tạo dòng T-vector phối hợp với kỹ thuật giải trình tự Sanger. Phương pháp nghiên cứu: Mô tả triển khai kỹ thuật mới. Kết quả: Chúng tôi đã thành công ứng dụng Delta-PCR (Polemerase Chain Reaction: phản ứng khuếch đại chuỗi) để khảo sát đột biến FLT3-ITD (Fms Related Receptor Tyrosine Kinase 3-internal tandem duplication: đột biến lặp đoạn gen FLT3). Kích thước đoạn chèn xác định bằng kỹ thuật Delta PCR ở cả 4 người bệnh đều hoàn toàn phù hợp với kỹ thuật tạo dòng và giải trình tự Sanger. Kỹ thuật này có thể định danh các dòng và xác định tỉ lệ các dòng đột biến FLT3-ITD với giới hạn phát hiện thấp đến 0,1%. Kết luận: Kỹ thuật này ưu thế trong việc xác định các dòng minor, là công cụ tiềm năng trong ứng dụng theo dõi tồn lưu tế bào ác tính mang đột biến FLT3-ITD.
To perform Delta-PCR technique in detecting FLT3-ITD mutations. Subjects: Patient samples with 2 types of FLT3-ITD mutations were diagnosed by Tvector cloning associated with Sanger sequencing. Method: Prospective case series. Results: We have successfully applied Delta- PCR technique in detecting FLT3-ITD mutations. The size of ITDs identified by Delta PCR in all of 4 patients were similar to the results of cloning and Sanger sequencing techniques. This method could identify FLT3- ITD mutant clones and determine FLT3 allel ratio with limit of detection as low as 0.1%. Conclusion: Delta-PCR could detect FLT3- ITD mutant clones at low level, so it will be useful device in monitoring mesurable disease postreatment.
- Đăng nhập để gửi ý kiến