Định lượng đồng thời cortisol và testosterone trong huyết thanh chuột bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép nối đầu dò khối phổ

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép nối đầu dò khối phổ với chế độ ion hóa phun điện tử dương (LC-ESI-MS/MS) được phát triển để định lượng đồng thời cortisol và testosterone trong huyết thanh chuột. Chế độ MRM (Multiple Reaction Monitoring) được sử dụng để tối ưu: m/z ion mẹ, thế phân mảnh, m/z ion con và năng lượng bắn phá tạo ion. Các mẫu phân tích được xử lý bằng phương pháp chiết xuất pha rắn với cột Bond Elut C18. Phương pháp phân tích được thẩm định theo hướng dẫn phân tích thuốc trong dịch sinh học của FDA. Kết quả cho thấy phương pháp phân tích có khoảng định lượng rộng (0,1– 100 ng/mL đối với cortisol và 0,025 – 100 ng/mL đối với testosterone), tính tuyến tính tốt (r2 > 0,999), giới hạn định lượng thấp (LLOQ của cortisol và testosterone lần lượt là 0,1 ng/mL và 0,025 ng/mL), độ thu hồi cao (90,4% - 108,0%), đảm bảo độ lặp lại (với CV từ 2,7% - 14,8%), mẫu ổn định trong các điều kiện khác nhau. Phương pháp phân tích đã được ứng dụng để định lượng nồng độ cortisol và testosterone trong một số mẫu máu chuột thí nghiệm.