Chứng tăng đông máu thrombophilia là các rối loạn tạo huyết khối, có thể gây tắc tĩnh mạch dẫn tới bệnh nguy hiểm như tai biến, đột quỵ, thậm chí tử vong. Bên cạnh các nguyên nhân liên quan đến chuyển hóa, biến thể di truyền cũng có tác động đến biểu hiện của bệnh. Vì vậy, sàng lọc thrombophilia di truyền thông qua phân tích các biến thể của gen (cụ thể là allen) được quan tâm trong các xét nghiệm nhằm sàng lọc yếu tố có nguy cơ cao gây tăng đông máu. Hiện nay đã có ít nhất 12 biến thể ở 7 gen được xác định bởi các bộ kit thương mại. Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng kĩ thuật khuếch đại đặc hiệu allen (ARMS – PCR) để phân tích 4 biến thể ở 3 gen có tần số biến đổi cao là Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR C677T và MTHFR A1298C), Factor V Leiden (FVL C1691T) và Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1 4G/5G). Kết quả cho thấy cả 8 allen của 4 biến thể được phát hiện rõ ràng trong 3 phản ứng ARMS-PCR đa mồi. Kết quả giải trình tự và đối chiếu với bộ kit realtime Multiplex PCR thương mại cho 10 mẫu sinh phẩm đã khẳng định tính đặc hiệu, chính xác của các mồi được thiết kế và tối ưu trong từng phản ứng ARMS-PCR.
Thrombophilia is a condition that may cause venous obstruction, leading to serious illnesses such as stroke, respiratory failure, and even death. This condition is hereditary or related to the immune system. Inherited thrombophilia is screened by analysing genetic variants (allele). In this study, we analyse 4 variations in 3 genes, which occur at high variable frequency, namely Methytetrahydrofolate Reductase (MTHFR C677T, MTHFR A1298C), Factor V Leiden (FVL C1691T) and Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI-1 5G/4G), using allele-specific polymerase chain reaction (ARMS-PCR). The primers were designed using FastPCR program and PCR conditions were optimized to identify 8 alleles of 4 variants through 3 multiplex ARMS - PCR reactions. The accuracy of the ARMS - PCR results was confirmed by Sanger sequencing and the real time PCR commercial kit (SNP). Mastering the allele specific PCR technique contributes to the survey of genetic variations in the Vietnamese population in order to screen and treat thrombophilia-related diseases.
- Đăng nhập để gửi ý kiến