Cordyceps militaris là loài nấm dược liệu quan trọng trong y học cổ truyền. Chúng chứa nhiều hoạt chất có hoạt tính sinh học ứng dụng trong y học như cordycepin, adenosine… Gần đây thông qua phân tích hệ gen, C. militaris đã được chứng minh có khả năng sinh tổng hợp pentostatin. Pentostatin là hoạt chất quan trọng trong sản xuất các loại thuốc hóa trị sử dụng trong điều trị ung thư. Tuy nhiên, việc phát triển các phương pháp định lượng pentostatin trong nấm C. militaris chưa có nhiều nghiên cứu đề cập. Trong nghiên cứu này, các tác giả xây dựng và thẩm định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC-DAD) đơn giản với độ chính xác cao để định lượng pentostatin trong quả thể nấm C. militaris. Quá trình sắc ký được thực hiện trên cột C18 của Hãng Agilent (250x4,6 mm, 5 µm) với chương trình rửa giải gradient sử dụng hệ dung môi pha động gồm acetonitrile và nước. Tốc độ rửa giải là 0,6 ml/phút, bước sóng phát hiện được lựa chọn là 280 nm. Đường chuẩn xây dựng được đều đạt độ tuyến tính cao với R2 >0,99. Kết quả thẩm định phương pháp về độ lặp lại, hiệu suất thu hồi, độ chọn lọc đều đạt theo hướng dẫn của Hội nghị quốc tế về hài hòa các thủ tục đăng ký dược phẩm sử dụng cho con người (International Conference on Harmonization).
Cordyceps militaris is an important medicinal mushroom in traditional medicine. It contains many bioactive compounds that have applications in medicine, such as cordycepin, adenosine... Recently, through genome analysis, C. militaris has been shown to have the ability to synthesise pentostatin. Pentostatin is an important active ingredient in the production of chemotherapy drugs used in cancer treatment. However, there have been few studies on the development of methods for quantifying pentostatin in C. militaris. In this study, a simple and sensitive high-performance liquid chromatography with diode-array detection (HPLC-DAD) method for the quantification of pentostatin in C. militaris was developed and validated. The chromatographic separations were obtained by an Agilent C18 column (250x4.6 mm i.d., 5 µm particle size) using gradient elution with acetonitrile and water. The flow rate of 0.6 ml/min and detection wavelength of 280 nm were se-lected. The calibration curve displayed a good linear correlation (R2 >0.99). The validation results displayed great accuracy, repeatability, linearity, and se-lectivity according to The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (ICH) guideline.
- Đăng nhập để gửi ý kiến