Thiết lập quy trình giải trình tự gen FBXO7 để khảo sát các đột biến trên gen này ở 20 bệnh nhân Parkinson người Việt Nam. Phương pháp: Tách chiết DNA từ mẫu máu của bệnh nhân Parkinson, thiết kế mồi, chuẩn hóa mồi cho phản ứng PCR khuếch đại 9 exon của gen FBXO7, chuẩn hóa quy trình giải trình tự Sanger để phát hiện đột biến trên gen FBXO7 ở 20 bệnh nhân thử nghiệm trong nghiên cứu. Kết quả: Tối ưu hóa thành công phản ứng PCR khuếch đại 9 exon của gen FBXO7, chuẩn hóa thành công quy trình giải trình tự Sanger cho tất cả các exon của gen FBXO7. Phát hiện các biến thể dị hợp tử trên gen FBXO7 c.1493G>A (p. Arg498Gln) và c.587A>G (p.Asn196Ser) ở 2 bệnh nhân PD. Ngoài ra, chúng tôi còn phát hiện một biến thể dị hợp tử c.345G>A (p.Met115Ile) ở 5 bệnh nhân PD khác. Kết luận: Quy trình phản ứng PCR và giải trình tự cho tất cả các exon của gen FBXO7 được xây dựng thành công qua nghiên cứu này. Kết quả giải trình tự Sanger phát hiện một số biến thể bất thường trên gen FBXO7. Cần có các nghiên cứu sâu hơn về mối liên quan của các biến thể này với bệnh lý PD.
Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease after Alzheimer's disease, first described in 1817 by Dr. James Parkinson with the following characteristics: involuntary tremors, muscle weakness, hunched forward walking style. Recent studies have reported that FBXO7 gene is associated with with early-onset Parkinson's disease. Objective: To establish the genetic sequencing process to investigate FBXO7 variants among 20 Parkinson's patients in Vietnam. Methods: Genomic DNA from blood samples of Parkinson's patients were extracted, the primers for PCR amplification of all FBXO7 exons were designed and standardized. The Sanger sequencing process was developed to detect FBXO7 variants in 20 studied patients. Results: The PCR reactions amplifying all 9 exons of the FBXO7 gene were optimized, the Sanger sequencing process for these exons were also standardized. The heterozygous variants c.1493G>A (p.Arg498Gln) and c.587A>G (p.Asn196Ser) were detected in 2 patients. Another variant on the FBXO7 gene c.345G>A (p.Met115Ile) was detected in 5 other PD patients. Conclusion: The protocol for PCR and sequencing of all exons in FBXO7 gene was successfully developed. The primary results showed several variants of uncertain significance. Further studies are required to understand better the role of these variants in the pathogenesis of PD.
- Đăng nhập để gửi ý kiến